Ceditest CSFV-Ag
猪瘟病毒抗原 ELISA 检测试剂盒
检测全血、血浆、血清和组织样品中的猪瘟病毒
(以试剂盒内的英文说明书为准)
 
一、简介
     这些年来，荷兰动物科学与健康研究所（ID-Lelystad）已经建立了控制和消除动物疾病的专业技术
和知识体系。除了进行病因和致病机理的基础研究外，该研究所还为全球的专业实验室和兽医服务机构
提供了病毒学、细菌学、寄生虫学和免疫学研究工具。
古典猪瘟（CSF）需要结合既往病历、临床照片和实验室检测来进行诊断。CSF 的确诊还需要在能
检测样品中的抗体和/或抗原的专业实验室中进行。为了防止 CSFV 的扩散，早期的病毒监测是十分重
要的。对可疑感染猪群的早期检测都是针对 CSFV 抗原而不是针对 CSFV 抗体，因为 CSFV 抗体在感染
后 14 天才出现。
一些试验曾经被用于检测 CSFV 抗原，如直接荧光抗体试验（Ressang, 1973, (1)）和直接免疫过氧
化物酶试验(Wensvoort et al, 1986 (2)。通过病毒分离和 ELISA 能检测全血、血浆、血清、白细胞浓缩物
和组织抽提液等样品。从细胞培养基中分离病毒是“金标准”检测方法，但费时、费力；相反，ELISA
是一种简单快速的检测方法，能在短时间内检测大量样品。尽管 ELISA 对新感染猪只的检测受敏感性
的制约(Kaden et al, 1999 (3))，但它仍是一种有价值的CSFV 诊断工具。加大可疑猪群的样品数可提高
诊断的敏感性(Martin et al, 1992 (4))。CSFV 检测方法的选择性是另一个应该被考虑的重要方面。由于猪
群中交叉感染了非 CSFV 的瘟疫病毒，许多检测方法都缺乏选择性。
考虑到 CSFV 是一种需要申报的疾病，假阳性结果（由于缺乏特异性引起）会引发一系列不正确
的措施，所以应该尽量避免假阳性结果的出现。 
Ceditest
CSFV-Ag 是一种可增加诊断可信度，从而最终确认 CSFV 感染的辅助诊断工具。结合敏 
CSFV-Ag（高特异性和选择性）能优先减少假阳性结果。因此 Ceditest
感性最高的试验，Ceditest
CSFV-Ag 应该用来检测从出现症状的可疑猪群中采集的样品。 
Ceditest
CSFV-Ag 具有很高特异性和选择性，是一种优秀的猪瘟感染的辅助诊断工具。需要注意
CSFV-Ag 诊断出的阳性结果应该用“金标准”方法（如病毒分离）加以确证。
的是，用 Ceditest
 
 
二、参考文献
1 Ressang, A.A., (1973). Studies on the pathogenesis of hog cholera. I. Demonstration of hog
cholera subsequent to oral exposure. Zbl. Vet. Med. B 20, 256 ¨C 271.
2 Wensvoort et al, (1986). Production of monoclonal antibodies against swine fever virus and
their use in laboratory diagnosis. Vet. Microbiol. 12, 101 ¨C 108.
3 Kaden et al, (1999). Vergleich labordiagnostischer Methoden zum Nachweis einer Infektion
mit dem Virus der Klassischen Schweinepest (KSPV) in der fr¨1hen Infektionsphase:
Experimentelle Studie. (Comparison of different diagnostic  methods for the detection of
classical swine fever virus (CSFV) in the early infection period). Berl. M¨1nch. Tier?rtzl.
Wschr., 112, 52 - 57.
4 Martin et al, (1992). Evaluating the health status of herds on tests applied to individuals. Prev.
Vet. Med. 14, 33 ¨C 34.
 
三、应用
 
Ceditest CSFV-Ag 主要用于检测 CSFV 感染可疑猪群的样品。在进行免疫的 CSF 流行国家和地区， 
Ceditest
CSFV-Ag 还用于检测 CSFV 的残留。为了提供诊断的敏感性，样品的提取者应该操作熟练。而
且，为了提高诊断的可信度，也要结合其他的 CSFV-Ag 的检测方法，如荧光抗体试验和直接（或间接）
免疫过氧化酶试验。
 
四、原理
 
The Ceditest CSFV-Ag基于夹心 ELISA 原理。酶标板用 CSFV 特异性抗体包被，第一步，稀释样
品，加待测样品(全血、血清、血浆、凝集白细胞或织抽提液)到所有孔并孵育。第二步，洗涤，并加入
高特异性的抗 CSFV 酶标结合物到所有孔内，孵育一段时间后洗涤。加底物/显色剂孵育后能看见已与  
                                                         
抗体结合的酶标结合物。加终止液终止反应并用酶标仪测量OD 。检测结果用阳性百分率（PP）表
450nm
示。加底物/显色剂溶液后呈现蓝色反应，表明 CSPF-Ag 阳性；不显色或显色微弱，表明 CSFV-Ag 阴
性。
值 100PP，
试剂盒里有 3 份参考样本（标示为 1，2 和3）。假定参考样本 1（标准阳性对照）的 OD
450
其他样品的 OD值与参考样本 1 相比转换成相应的 PP值。参考样本 2 是标准阴性对照，参考样本 3 是
弱阳性对照。参考样本3 用来监控试剂盒的性能。
 
 
五、一般评述
 
本说明书内容的改变不用另行通知。本说明书在出版时是完整而正确的，赛迪诊断公司不承担本说
明书中出现的任何错误。赛迪诊断公司在任何情况下都不应该对操作不当引起的损失负责，也不应该对
 
经济损失、财产损失或其他由赛迪产品的使用、丢失引起的任何损失负责。
 
六、试剂盒组成
 
1.  酶标板 2 块  (2 frames, each with 12 eight-wells strips in an aluminium foil bag)
2.  样品稀释液 2 瓶（直接使用）
3. 1 瓶冻干参考样本 1（强阳性对照）1 vial lyophilized reference 1 (strong positive)
4. 1 瓶冻干参考样本 2（空白对照）1 vial lyophilized reference 2 (blank)
5. 1 瓶冻干参考样本 3（弱阳性对照）1 vial lyophilized reference 3 (weak positive)
6. 1 瓶冻干酶标记物添加剂 1 vial lyophilized conjugate additive
7. 1 瓶浓缩酶标记物 1 vial conjugate (concentrated)
8. 1 瓶去离子水 1 vial demineralized water
9. 1 瓶稀释缓冲液（直接使用）1 vial dilution buffer (ready-to-use)
10. 1 瓶底物/显色剂（直接使用）  1 vial chromogen/substrate (ready-to-use)
11. 1 瓶终止液（直接使用）1 vial stop solution (ready-to-use)
12. 1 瓶浓缩冲洗液 1 vial washing fluid (concentrated)
13. 1 个封口器 1 black closure  
14. 1 个封口膜 1 lid to cover the strips during incubation
 
七、贮存条件
 
试剂盒不能马上使用，必须恢复到室温。试剂盒必须保存在2-8℃直至过期。
在打开铝箔纸取出酶标板前，先将其恢复至室温（20 ¨C 2℃）。
打开铝箔纸后，取出所需的酶标条，立即把不用的酶标条放回到铝箔纸并用封口器密闭。
重新密封的酶标板必须储存于2-8℃，在过期前的六个月内使用。
 
八、注意事项
 
1.  仔细阅读底物/显色剂溶液瓶上的标签内容。
2.  终止液为强酸，避免接触皮肤和眼睛。
3.  试剂盒中的试剂在使用之前必须恢复至室温（20 ¨C 2℃）。
4.  洗涤是影响试剂盒性能的一个关键因素。如参考样本 2的光密度值大于 0.300，原因很可能是洗涤不
充分。
洗涤程序（至少进行 6次）：吸取 400ul 洗液至每孔，倒去洗液后重新加入洗液。加洗液时应避免形
成气泡。最后一次洗涤后一定要拍干。当使用自动洗板装置且阴性对照的OD值大于 0.300 时，按上
述方法进行人工洗涤。
5.  待测样品必须保持无菌，以便能在随后的病毒分离试验中得到确认。
6.  待测样品可能含活病毒。立即对使用过的材料（枪头、封条器）和工作间进行消毒是极其重要的。
可使用的消毒剂有 1% 的 Halamid、0.4%的氢氧化钠或 1%的戊二醛（CSFV在 6 分钟内减少 4-5log）。